Análisis de la utilidad diagnóstica de los medios cromógenos para el crecimiento del género Candida
Mónica Celeste Aranda-Torales1, María Perla Carolina Cabrera-Galeano1 y Carlos Héctor Molinas-Duré1
1Carrera de Bioquímica (Asunción), Facultad de Medicina, Universidad del Norte, Paraguay
Resumen
Candida spp. son levaduras diploides sexuales eucariotas. La candidiasis se considera una de las infecciones oportunistas más frecuente en seres humanos. En el mercado actual existen diferentes medios de cultivo con sustratos cromógenos como el CHROMagar Candida, CHROMagar Candid™, Candida ID, ChromAgar Candida®, medio cromógeno Brillianc™ Candida Agar. El objetivo de este estudio fue analizar la utilidad diagnóstica de los medios cromógenos para el crecimiento del género Candida. El enfoque de la investigación fue observacional retrospectivo. La información procesada se obtuvo de CICCO, ScieLo, Hinari y Elsevier, usando las palabras claves “medios cromógenos”, “Candida sp”, “sensibilidad”, “especificidad”, “valor predictivo”. Diez artículos fueron seleccionados que contaban con los datos necesarios. Valores altos de sensibilidad, especificidad y valores predictivos estuvieron relacionados con la cantidad de muestra utilizada, siendo directamente proporcionales. Rendimientos bajos se vincularon con la no utilización de un medio para el aislamiento primario a partir del espécimen biológico, lo que inducía a resultados falsos. En conclusión, al inicio de esta investigación se propuso como objetivo general analizar la utilidad diagnóstica de los medios cromógenos para el crecimiento del género Candida, especialmente de 3 especies que son las que se presentan con mayor frecuencia. Se destaca que las cuatro variables analizadas resultan ser esenciales para el correcto diagnóstico de los pacientes, dado que la identificación correcta del agente causal puede modificar la conducta terapéutica. Se destaca de todos los medios analizados el CHROMagar Candida (Becton-Dickinson).
Abstract
Candida spp. correspond to eukaryotic sex diploid yeasts. Candidiasis is considered one of the most frequent opportunistic infections in humans. In the current market there are different culture media with chromogenic substrates such as CHROMagar Candida, CHROMagar Candida™, Candida ID, ChromAgar Candida®, chromogen medium Brilliance™ Candida Agar. The aim of this study was to analyze the diagnostic utility of chromogenic media for the growth of the genus Candida. The research approach was observational retrospective. The processed information was obtained from CICCO, ScieLo, Hinari and Elsevier, using the keywords “chromogenic media”, “Candida sp”, “sensitivity”, “specificity”, “predictive value”. Ten articles were selected that had the necessary data. High values of sensitivity, specificity and predictive values were related to the amount of sample used, being directly proportional. Low yields were linked to the non-use of a means for primary isolation from the biological specimen, which led to false results. In conclusion, at the beginning of this research it was proposed as an overall goal to analyze the diagnostic utility of chromogenic media for the growth of the Candida genus, especially of 3 species that are the ones that occur most frequently. It is highlighted that the 4 variables analyzed are essential for the correct diagnosis of patients, since the correct identification of the causative agent can modify the therapeutic behavior. The CHROMagar Candida (Becton-Dickinson) stands out from all the media analyzed.
Introducción
Candida spp. son levaduras diploides sexuales eucariotas del reino Fungi, de las cuales se han identificado más de 150 especies. Sólo un pequeño número son patógenos humanos. Los miembros del género Candida son muy heterogéneos por lo que crecen como levaduras (blastosporas) o en forma filamentosa (pseudohifas, pseudomicelio) (1). La candidiasis es una infección cosmopolita. Se considera una de las infecciones oportunistas más frecuente en seres humanos. El principal agente es Candida albicans, pero pueden estar implicadas otras especies de Candida, como, Candida dubliniensis, Candida glabrata, Candida famata, Candida krusei, C. lusitaniae, Candida parapsilosis, Candida tropicalis, y otras.
Su incidencia ha aumentado considerablemente en los últimos 20 años. Las levaduras son causantes del 7% de las micosis, el 25% de las micosis superficiales y entre el 75% y 88% de las infecciones fúngicas nosocomiales. Afecta a individuos de cualquier edad, sexo o grupo étnico (2). En Paraguay, se reportaron 2363 casos en el 2010, 1764 casos en el 2011, y 4017 casos en el 2015, según el anuario de las enfermedades registradas en los servicios del Ministerio de Salud Pública y Bienestar Social (3–5).
Actualmente en el mercado existen diferentes medios de cultivo con sustratos cromógenos que han demostrado su indudable valor como herramienta para el diagnóstico presuntivo de levaduras. Entre ellos podemos citar CHROMagar Candida, CHROMagar Candida™, Candida ID, CHROMagar Candida®, medio cromógeno Brilliance™ Candida Agar.
La importancia de este trabajo de investigación radica en comparar la sensibilidad, especificidad, valor predictivo, de los citados medios de cultivos. El objetivo de este estudio es analizar la utilidad diagnóstica de los medios cromógenos para el crecimiento del género Cándida. El enfoque de la investigación es observacional-documental, retrospectivo, de corte transversal.
Material y método
Este fue un estudio observacional documental retrospectivo. Con respecto a los buscadores, la información procesada se obtuvo de CICCO, ScieLo, Hinari, Google Scholar y Elsevier. Se usaron las siguientes palabras claves: “medios cromógenos”, “Candida sp”, “sensibilidad”, “especificidad”, “valor predictivo”. Se identificaron 20 artículos en la literatura, accesibles. De estos 20 artículos, 10 fueron eliminados porque no contaban con todos los datos necesarios. Por lo tanto, el análisis incluyó 10 artículos, según se muestra en el Cuadro 1.
| Fuente | Medio | N.º muestras |
|---|---|---|
| Ballesté et al.(6) | CHROMagar Candida™ | 127 |
| Quindós et al.(7) | Candida ID | 779 |
| García-Martos et al.(8) | CHROMagar Candida (Becton-Dickinson) | 2230 |
| Estrada-Barraza et al.(9) | Chromagar Candida® | 79 |
| Hernández et al.(10) | Brilliance™ Candida Agar | 436 |
| Souza et al.(11) | CHROMagar Candida (France) | 89 |
| Alfonso et al.(12) | Brilliance™ Candida Agar | 240 |
| Cortés et al.(13) | CHROMagar™ Candida y ID2™ Candida | 100 |
| Godoy et al(14) | Albicans ID | 190 |
| Faraz et al.(15) | CHROMagar Candida | 72 |
Resultados
El Cuadro 2 muestra el origen de las cepas, medios de reaislamiento y examen previo reportados en los artículos analizados. El Cuadro 3 muestra los valores reportados de las variables de interés en los estudios analizados.
| Fuente | Origen de las muestras | Medio de reaislamiento | Examen previo |
|---|---|---|---|
| Ballesté et al.(6) | 100 de especímenes biológicos; 17 de la Micoteca del Departamento de Parasitología y Micología del Instituto de Higiene (IHM) y 10 (ATCC) del (NCCLS) | Agar peptonado y agar glucosado de Sabouraud | Metodología convencional: morfología macro y microscópica de la colonias |
| Quindós et al.(7) | Aislamiento clínico y cepas de colección | Agar glucosado de Sabouraud | Prueba de producción de tubo germinal |
| García-Martos et al.(8) | Muestras clínicas de pacientes del Hospital Universitario Puerta del Mar de Cádiz | Agar de Sabouraud con cloranfenicol | No disponible |
| Estrada-Barraza et al.(9) | Muestras clínicas de pacientes con sospecha de candidiasis sistémica o diseminada | No disponible | No disponible |
| Hernández et al.(10) | Levaduras recolectadas durante examen clínico | No disponible | No disponible |
| Souza et al.(11) | Muestras de pacientes que acudieron al ISCMPA | No disponible | Prueba del tubo germinal |
| Alfonso et al.(12) | Las levaduras de muestras clínicas de pacientes de 3 Hospitales del GCBA | Agar glucosado de Sabouraud | Métodos convencionales |
| Cortés et al.(13) | Muestra de pacientes del Centro Médico Nacional 20 de Noviembre, ISSSTE | Agar dextrosa Sabouraud | No disponible |
| Godoy et al(14) | Cepas almacenadas en el Banco de Microorganismos del Laboratorio Especial de Micología, EPM-UNIFESP | Agar glucosado de Sabouraud | Morfología microscópica y pruebas bioquímicas realizadas con galería API-32C |
| Faraz et al.(15) | Muestras clínica de pacientes del Laboratorio Microbiológico de King Khalid, Hospital Al-Majmaah | No disponible | Identificación microscópica |
| Fuente | Especies | Color | S | E | VPP | VPN |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Ballesté et al.(6) | C. albicans | Verde | 88 | 96 | 97 | 84 |
| C. tropicalis | Azul | 96 | 88 | 84 | 97 | |
| C. glabrata | Blanco-amarillo | 96 | 88 | 84 | 97 | |
| Quindós et al.(7) | C. albicans | Azul | 98 | 99 | 99 | 97 |
| C. tropicalis | Rosado | 100 | 99 | 95 | 100 | |
| C. glabrata | ND | ND | ND | ND | ND | |
| García-Martos et al.(8) | C. albicans | Verde | 100 | 100 | 100 | ND |
| C. tropicalis | Azul-rosa | 100 | 100 | 100 | ND | |
| C. glabrata | Lila | 97 | 100 | 97 | ND | |
| Estrada-Barraza et al.(9) | C. albicans | ND | 98 | 100 | ND | ND |
| C. tropicalis | ND | 100 | 95 | ND | ND | |
| C. glabrata | ND | 100 | 100 | ND | ND | |
| Hernández et al.(10) | C. albicans | Verde | 100 | 98 | 97 | 100 |
| C. tropicalis | Azul | 94 | 98 | 89 | 94 | |
| C. glabrata | Café | 93 | 97 | ND | ND | |
| Souza et al.(11) | C. albicans | Verde | 79 | 89 | 76 | 90 |
| C. tropicalis | Azul | 46 | 95 | 80 | 81 | |
| C. glabrata | ND | ND | ND | ND | ND | |
| Alfonso et al.(12) | C. albicans | Verde | 85 | 92 | 73 | 96 |
| C. tropicalis | Azul | 61 | 98 | 84 | 94 | |
| C. glabrata | Café | 97 | 99 | 98 | 99 | |
| Cortés et al.(13) | C. albicans | Verde | 94 | 81 | ND | ND |
| C. tropicalis | Azul | ND | ND | ND | ND | |
| C. glabrata | Rosado | ND | ND | ND | ND | |
| C. albicans | Azul | 90 | 70 | ND | ND | |
| C. tropicalis | Rosado | ND | ND | ND | ND | |
| Godoy et al(14) | C. albicans | Verde | 100 | 90 | 88 | 100 |
| C. tropicalis | ND | ND | ND | ND | ND | |
| C. glabrata | ND | ND | ND | ND | ND | |
| Faraz et al.(15) | C. albicans | Verde | 100 | 97 | 97 | 100 |
| C. tropicalis | Azul | 85 | 98 | 86 | 99 | |
| C. glabrata | Lila | 100 | 88 | 74 | 100 |
Discusión
En el Cuadro 1 aparecen los autores de los artículos científicos seleccionados. García et al. fueron los que utilizaron la mayor cantidad de muestras (8), mientras que Faraz et al. fueron los que utilizaron la menor cantidad (15). En total se registraron 4342 y en promedio 434 muestras. En el Cuadro 2 se observan de donde fueron obtenidas las muestras. El 80% de las muestras provenía de aislamientos clínicos y el 20% provenía de Bancos de Microbiología y Micología. El medio de reaislamiento más utilizado fue el de Agar glucosado de Sabouraud. Entre los exámenes previos más utilizados estuvieron la metodología convencional (morfología macro y microscópica de la colonias) y la prueba del tubo germinal. Cabe destacar que en algunos casos no se utilizó medio de reaslamiento ni se realizó examen previo.
En el Cuadro 3 se puede apreciar que el mayor valor de sensibilidad para C. albicans es del 100%. Estos valores corresponden a los medios CHROMagar Candida (11) – relacionado a la producción de clamisdospora, fermentación y asimilación de compuestos de carbono –, Brillance™ Candida agar(12) – debido a su carácter seriado – y Albicans ID (9). El menor valor fue de 79%, correspondiente al medio CHROMagar Candida(Francia) (7). Esto puede ser debido a la cantidad de muestra y a que la misma fue obtenida a partir del hemocultivo. El mayor valor de especificidad fue del 100% para los medios CHROMagar Candida (Becton-Dickinson) (11) y Chromagar Candida® (6) y el menor fue de 70% para ID2™ Candida.
El porcentaje mayor del valor predictivo positivo fue del 100% para el medio CHROMagar Cándida (Becton-Dickinson) (11). Esto es debido a que este medio facilita en mayor medida el estudio de la morfología colonial y permite diferenciar con más precisión incluso identificar distintas especies. El menor valor fue de 73% para el medio Brillance Candida Agar (7). Esto se pudo dar debido a que este estudio fue realizado en distintos centros, por lo que existieron variaciones en la subjetividad en la observación realizada por distintas personas. El porcentaje mayor del valor predictivo negativo fue del 100% para el medio Brillance™ Candida Agar (12) y Albicans ID (10) y el menor fue de 81% para CHROMagar Cándida.
El mayor valor de sensibilidad para C. tropicalis fue del 100%. Correspondió a los medios CHROMagar Candida (Becton-Dickinson), Chromagar Candida y Candida ID (6,11,15). El menor valor fue de 46%, correspondiente al medio CHROMagar Candida (Francia) (12). Esto pudo haber sido a que otras especies de Candida también pueden presentar pigmentación rosada en las colonias. El mayor valor de especificidad fue del 100% para el medio CHROMagar Cándida (Becton-Dickinson)(11) y el menor fue de 81% para CHROMagar Candita ™ (14). El porcentaje mayor del valor predictivo positivo fue del 100% para el medio CHROMagar Cándida (Becton-Dickinson) (11) y el menor fue de 80% para el medio CHROMagar Candida (Francia) (12). El porcentaje mayor del valor predictivo negativo fue del 100% para el medio Candida ID (15). Esto fue por la detección de una actividad enzimática diferente. El menor valor fue de 81% para CHROMagar Candida (Francia) (12).
El mayor valor de sensibilidad para C. glabrata fue del 100% y correspondieron a los medios CHROMagar Candida (15) y ChroMagar Candida® (6), debido a las filamentaciones variables que presentaron. El menor valor fue de 93%, correspondiente al medio Brillance™ Candida agar (12), debido a la ausencia de filamentación en presencia de blastoconidias. El mayor valor de especificidad fue del 100% para el medio ChroMagar Cándida® (6), en vista de las filamentaciones variables. El menor valor fue de 88% para CHROMagar Candida (15). La limitación de este estudio fue la cantidad de muestras.
El porcentaje mayor del valor predictivo positivo fue del 98% para el medio Brilliance Candida agar (7) y el menor fue de 84% para el medio CHROMagar Candida (15). El porcentaje mayor del valor predictivo negativo fue del 100% para el medio CHROMagar Candida (15) y el menor fue de 97% para CHROMagar Candida™ (6).
El buen rendimiento obtenido por García et al. estuvo dado por factores como lectura de las placas a las 72 h para apreciar el color y prolongar el cultivo hasta los cinco días para apreciar mejor otras características de las colonias (8). Además, fue el estudio que utilizo la mayor cantidad de muestras. El bajo rendimiento obtenido por Souza et al. con respecto a los demás pudo haber estado influido porque el tipo de muestra fue el hemocultivo (11). Además, no se utilizó un medio para el aislamiento primario a partir del espécimen biológico ya que induce a resultados falsos fundamentalmente cuando identifica a las especies como “no albicans” Alfonso et al. sostienen que los datos de sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y negativo no son tan elevados dado que los medios identifican presuntivamente varias especies de levaduras (12). Además, existen variaciones que se deben a la subjetividad en la observación realizada por distintas personas.
En conclusión, al inicio de esta investigación se propuso como objetivo general analizar la utilidad diagnóstica de los medios cromógenos para el crecimiento del género Cándida, especialmente de tres especies que son las que se presentan con mayor frecuencia. Se destaca que las cuatro variables analizadas resultaron ser esenciales para el correcto diagnóstico de los pacientes, dado que la identificación correcta del agente causal puede modificar la conducta terapéutica. Sobresale de entre todos los medios analizados el CHROMagar Candida (Becton-Dickinson). Por otra parte, de acuerdo con este estudio se infiere que no es posible prescindir del estudio morfológico en los medios mencionados anteriormente. El estudio morfológico ofrece muchas facilidades para el reconocimiento de distintas especies que pueden coexistir en una misma muestra clínica.
Reconocimientos
Este artículo ha sido seleccionado por el Comité Científico del Programa de Iniciación Científica e Incentivo a la Investigación (PRICILA) como mejor artículo en el área de Medicina de la Facultad de Medicina de la ciudad de Asunción durante el Ciclo 1 (2019-2020). PRICILA es gestionado por la Dirección de Investigación y Divulgación Científica en conjunto con las Supervisiones de Facultades de Asunción y de Facultades Comunitarias, con fondos proveídos por el BBVA Paraguay y el Rectorado de la Universidad del Norte.Más información sobre PRICILA se encuentra disponible en http://investigacion.uninorte.edu.py/pricila/.
Para adecuarse al estilo de publicación de la Revista UniNorte de Medicina y Ciencias de la Salud (http://investigacion.uninorte.edu.py/rev-un-med), el contenido original ha sido modificado por la Oficina Editorial (editorial@uninorte.edu.py).
Correspondencia: Dr. Carlos Molinas, Facultad de Medicina, Universidad del Norte, Asunción, Paraguay. carlos.molidure@gmail.com
Fecha de recepción: 1 de noviembre de 2019
Fecha de aceptación: 22 de diciembre de 2019
Fecha de publicación: 25 de noviembre de 2020
Referencias
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- ND: no disponible↩︎